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《医疗废物处理处置污染控制标准》(征求意见稿)

时间:2020-02-13 11:23

来源:生态环境部

B.3.3 处理效果检测实验操作步骤

B.3.3.1 按实际使用情况,在消毒室内模拟摆放常规处理的医疗废物至使用说明书中规定的最高装载量(满载)。将枯草杆菌黑色变种芽孢(B.subtilis var.niger ATCC 9372)或嗜热脂肪杆菌芽孢(B.stearothermophilus ATCC 7953)菌片放入消毒袋内,然后置于消毒仓室各层4个角、中央的医疗废物中间和消毒仓室最难消毒的部位。放入试验菌片前,按设备使用说明书要求的方法做预湿处理。

B.3.3.2 菌片布放完毕后,关闭消毒仓室门,按设备使用说明书的消毒程序进行消毒试验。消毒或消毒完毕后,打开消毒仓室门,以无菌操作方式试验菌片。

B.3.3.3 将试验菌片分别加到装有5mL洗脱液的试管中,用手振荡200次,做10倍系列稀释,选择适宜稀释度,分别吸取1mL,以倾注法接种于两个平皿中,做活菌培养计数,即为实验组。

B.3.3.4 试验时应同时设立阳性对照组(菌片对照)与阴性对照组(培养基对照)。阳性对照组:将同批试验用的菌片放在室温下,待实验组达到规定作用时间后,立即将该菌片2片分别移入含5.0mL洗脱液的2个试管中,用手各振荡200下,其余步骤与实验组相同。阴性对照组:分别取1mL所用洗脱液放于平皿内,加入15mL-20mL培养基,置于37℃培养箱48h,观察有无污染。试验重复3次。

B.3.4 杀灭对数值的计算方法

首先计算各组的活菌数(cfu/片),并换算为对数值(N),然后按下式计算杀灭对数值:杀灭对数值(KL)=No-NxNo为对照组平均活菌数的对数值;Nx为实验组活菌数对数值。

B.3.5 消毒效果评价标准

在3次消毒实验中,每次试验中的阳性对照菌片回收菌量均应达5×105-5×106cfu/片,阴性对照组应无菌生长,每次试验各点的杀灭对数值均≥4.00,可判为消毒合格。

B.4 医疗废物高温干热消毒处理效果微生物检测程序和方法

B.4.1 试剂和材料

生物指示剂:枯草杆菌黑色变种芽孢(B.subtilis var.niger ATCC 9372)。

B.4.2 仪器和设备

与生物指示剂相匹配的生物培养器。

B.4.3 样品

选择国际通用的高温干热消毒用生物内含式生物指示剂,枯草杆菌黑色变种芽孢(B.subtilis var.niger ATCC 9372),含菌量为5×105-5×106cfu/片。

B.4.4 分析步骤

B.4.4.1 将多个生物指示剂菌管随同医疗废物,放置于杀菌室内蒸汽处理效果最难保证的空间位置,或将菌管放置在包装盒内并裹挟进医疗废物中,在国家标准规定的灭菌参数下,进行消毒处理。

B.4.4.2 消毒处理完毕后,取出指示菌剂,捏碎玻璃管,按照产品规定的培养温度和培养时间进行培养(如无特殊说明,培养温度为56℃,培养时间为48h),同时以没有经历消毒处理的生物指示剂菌管做对照,并观察培养基颜色变化。

试验重复3次。

B.4.5 消毒效果评价标准

以经过消毒的阴性菌管与阳性对照菌管的颜色变化相同与否判断是否到达消毒效果要求,阴阳菌管颜色变化相同或都不发生变化,说明消毒不合格;颜色变化不同,说明消毒合格。

B.4.6 精密度和准确度

活菌计数因技术操作而引起的菌落数误差率(平板间、稀释度间)不超过10%。

B.4.7 质量保证和质量控制

在3次试验中,对照组细菌芽孢数量应在5×105-5×106cfu/g以上,阴性对照组均无菌生长,该实验结果可用。

编辑:赵凡

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